Guida di solventi HPLC

Guida di solventi HPLC

Gli scienziati usano sistemi HPLC (cromatografia liquida ad alta prestazione) per identificare soluzioni o per determinare la concentrazione di una molecola in una soluzione. I solventi sono una componente fondamentale per ottenere buoni risultati.

Funzione

La fase mobile di un sistema HPLC è un liquido che scorre continuamente attraverso il sistema HPLC. Fase mobile è costituita da solventi non polari e altri ingredienti quali sali o soluzione tampone. Dopo che un campione viene iniettato in HPLC, il solvente (fase mobile) trasporta il campione lungo una colonna (la fase stazionaria). La combinazione di peso molecolare e la polarità, la composizione chimica del solvente e interazioni con la colonna (un metallo o vetro tubo imballato con silice) producono un cromatogramma.

Caratteristiche

Fase mobile è il più comunemente una combinazione di acqua di grado (ultrapura) HPLC e un solvente organico come metanolo o acetonitrile. Una piccola quantità di acido (0,1%) è aggiunto per migliorare la forma del picco sul cromatogramma prodotto da HPLC. Solventi sono valutati sull'indice di polarità Snyder per polarità e altre proprietà.

Considerazioni

Compatibilità di polarità è chiave nella scelta di solventi per la fase mobile. Se il solvente polarità è troppo alto, è possibile che il picco di campione sarà perso fra il rumore causato dal fronte del solvente presto nel cromatogramma. Se la polarità di un solvente è troppo bassa, il tempo di ritenzione del campione sarà lungo e questo può comportare un piccolo picco.