Cosa succede alla dimensione dei frammenti di DNA, come ci si sposta dal catodo all'estremità dell'anodo del Gel?

Cosa succede alla dimensione dei frammenti di DNA, come ci si sposta dal catodo all'estremità dell'anodo del Gel?

L'elettroforesi del gel dell'agarosi è un metodo utilizzato per visualizzare il DNA come ben separati frammenti di DNA di dimensioni. L'elettroforesi utilizza un campo elettrico per separare molecole elettricamente cariche. L'acido desossiribonucleico o DNA, trasporta una carica negativa netta; Questo rende possibile disegnare elettroforeticamente le molecole verso un polo di carica positiva. Gel di agarosio serve come il mezzo attraverso il quale le molecole di DNA migrano come sono separati mediante elettroforesi.

Il Gel di caricamento

L'elettroforesi del gel dell'agarosi separa le molecole di DNA basate sulla dimensione dei frammenti contenuta nel campione. Piccoli fori nella parte superiore del gel, chiamato "pozzi", vengono caricati con il liquido che contengono il DNA per essere esaminato. Questo fine del gel è posto all'anodo, o fonte elettrica con carica negativa.

Piccoli frammenti

Frammenti di DNA sono attirati verso il catodo, o fonte elettrica con carica positiva. Mentre le molecole migrano attraverso il gel dell'agarosi, cominciano a separare in base alle dimensioni. I più piccoli frammenti di DNA sono quelli del più basso peso molecolare; questi frammenti sono il più veloce per eseguire la migrazione verso la fine del catodo del gel.

Frammenti più grandi

Come frammenti di DNA diventano più grandi e hanno più alti pesi molecolari, sono più lenti di muoversi attraverso il gel dell'agarosi verso il catodo; Pertanto, i più grandi frammenti di DNA si trovano vicino alla fine di anodo del gel, mentre i più piccoli frammenti di DNA si trovano vicino alla fine del catodo.

Visualizzazione

Frammenti di DNA possono essere visualizzati sotto una sorgente di luce ultravioletta macchiando li con un bromuro di etidio chiamato chimica speciale. Quando esposto alla luce u.v., DNA frammentato apparirà in una formazione di scaletta, con i frammenti più pesanti e più grandi del DNA nella parte superiore della scala e i frammenti di DNA più leggeri, più piccoli nella parte inferiore della scala.