La reazione a catena della polimerasi o PCR, è una tecnica usata per fare copie di DNA. In particolare, PCR utilizza un enzima conosciuto come una polimerasi, che aggiunge di che basi di DNA individuale ad una crescente catena di DNA. La reazione di PCR è dipendente i primers, brevi filamenti di DNA polimerasi deve iniziare la riproduzione del DNA e la matrice di primer, una miscela dei reagenti e degli iniettori stessi. Ogni reazione di PCR dovrebbe essere un volume totale di non più di 50 uL.
Istruzioni
• Aggiungere 2,5 uL del buffer PCR in una provetta Eppendorf, nonché 2,5 uL dei dNTP.
• Aggiungere 2 uL (50 pmol) dei primer per il tubo Eppendorf e 1 uL di MgCl2.
• Aggiungere acqua per raggiungere un volume finale di 50 uL. Aggiungere 1 pmol del DNA template, o 1 µ l di soluzione di DNA, a seconda di quale è più facile da misurare. Matrice del primer è preparato.
• Ripetere i passaggi da 1 a 3 per le matrici come molti come si desidera preparare.