Colorazione di Gram è una procedura comunemente usata nella biologia e nella medicina per aiutare a distinguere tra batteri Gram-positivi e batteri gram-negativi. Ecco come fare una colorazione di Gram.
Istruzioni
• Un campione di una coltura batterica viene posto su un vetrino da microscopio. Un ciclo di inoculazione può essere utilizzato per trasferire i batteri alla diapositiva.
• Utilizzare un bastone di legno per spalmare la coltura batterica sopra il vetrino da microscopio. Volete avere un sottile strato uniforme di cultura sulla diapositiva.
• Far asciugare il vetrino contenente la coltura batterica. Questo è spesso fatto tenendo il vetrino sopra una piccola fiamma di un becco Bunsen.
• Versare cristalvioletto macchia sopra il campione batterico sulla diapositiva. Far scorrere il supporto per circa 10-60 secondi a seconda dello spessore dello striscio sulla diapositiva. Sciacquare la macchia viola di cristallo esterno della diapositiva con acqua.
• Soluzione di iodio di luogo Gram sulla sbavatura batterica. Lasciate lo striscio riposare per altri 10 a 60 secondi a seconda dello spessore di sbavatura. Risciacquare il supplementare iodio soluzione Gram con più acqua.
• Aggiungere qualche goccia di un decolorante dello striscio batterica sulla diapositiva. Decolorizers che vengono spesso utilizzati sono acetone o alcol. Sciacquare il decolorante esterno della diapositiva quando il decolorante non è colorata con le macchie precedenti come il decolorante corre fuori della diapositiva. Un tempo tipico per questo è di circa 5 secondi.
• Mettere un colorante di contrasto, come Fucsina basica soluzione o safranina, sulla diapositiva sopra lo striscio batterica. Consentire la controcolorazione a rimanere sulla sbavatura per circa 40-60 secondi e poi risciacquare la controcolorazione con acqua. Lasciare asciugare all'aria.
• Utilizzare un microscopio per esaminare il vetrino contenente lo striscio batterico. Batteri Gram-positivi saranno colorati viola, e batteri gram-negativi avranno un colore rosso o rosa.
Consigli & Avvertenze
- Seguire tutte le norme di sicurezza di laboratorio quando si lavora con soluzioni chimiche, campioni di batteri e il fuoco.