Come faccio a isolare i batteri dal suolo?

Isolamento di batteri dal suolo è un primo passo importante in molti esperimenti di microbiologia. Una volta che essi sono isolati, batteri possono essere ulteriormente analizzati per determinare le cose, come la loro specie e la loro funzione nell'ambiente terreno. Anche una piccola quantità di suolo può contenere milioni di batteri, che rende necessario per diluire un campione di terreno prima di isolare i batteri dal campione.

Istruzioni

• Misurare 100 ml. acqua distillata acqua nel cilindro graduato e aggiungerlo alla bottiglia sterile.

• Pesare 1 g del campione di terreno e aggiungerlo alla bottiglia di acqua distillata. Strettamente ricopra la bottiglia e agitare per mescolare bene la soluzione.

• Etichettare le provette sterili "10 ^ -3," "10 ^ -4," "10 ^ -5," e "10 ^ -6." Aggiungere 9 ml di acqua distillata in ciascuna delle provette, utilizzando uno delle pipette.

• Trasferire 1 ml della soluzione in bottiglia nella provetta etichettata "10 ^ -3," utilizzando una pipetta. Richiudere la provetta e agitare di delicatamente fino a quando la soluzione è ben amalgamata.

• Trasferire 1 ml della soluzione nella "10 ^ -3" provetta per la "10 ^ -4" tubo con una pipetta. Cap la "10 ^ -4" tubo e per mescolare. Ripetere questo metodo per trasferire la soluzione dalla "10 ^ -4" tubo per la "10 ^ -5" tubo e quindi dalla "10 ^ -5" tubo per la "10 ^ -6" tubo.

• Piatto tre campioni ciascuno dalla "10 ^ -4," "10 ^ -5" e "10 ^ -6" tubi. Utilizzare una pipetta per trasferire 1 ml di soluzione dal tubo in una piastra di Petri. Aggiungere circa 15 ml di agar nutriente alla piastra; poi mettere il coperchio sulla piastra e agitare delicatamente in modo che l'agar copre il fondo del piatto.

• Fare un piatto di controllo mettendo 1 ml di acqua distillata in una piastra di Petri, utilizzando una pipetta. Aggiungere l'agar; mettere il coperchio e agitare la piastra.

• Lasciare le piastre di Petri in posizione verticale fino a quando l'agar ha impostato. Poi invertire le piastre e incubare li---in un'incubatrice o a temperatura ambiente---appena 24 ore e fino a cinque giorni.

• Rimuovere le piastre dall'incubatrice dopo la quantità desiderata del tempo di incubazione. Conta delle colonie batteriche su piastre contenenti circa 30 a 300 colonie. Utilizzare un pennarello per segnare le colonie che hai già contato al fine di evitare il conteggio delle colonie stesse due volte.

• Dividere il numero di colonie contato di diluizione---"10 ^ -4," "10 ^ -5" o "10 ^ -6"---della soluzione del suolo per ogni piatto. Trovare il numero di batteri coltivabili nell'originale grammo di suolo calcolando i risultati da ciascuna piastra numerabile.