Come eseguire le macchie perossidasi

Come eseguire le macchie perossidasi

Rilevazione degli anticorpi è importante per sia la ricerca di laboratorio e diagnostica clinica. Normalmente, gli anticorpi sono invisibili. Se si desidera rilevare gli anticorpi in un pezzo di tessuto, è necessario utilizzare una strategia diversa da solo guardando attraverso un microscopio. Fosfatasi alcalina macchiatura e perossidasi colorazione sono due tali metodi. Nella macchiatura perossidasi, un enzima chiamato perossidasi, che si trovano negli anticorpi, viene utilizzato per catalizzare una reazione chimica, risultante in una membrana colorata.

Istruzioni

• Mescolare i 10 mL di derivato naftolo e la bottiglia di soluzione di derivati della benzidina per rendere una soluzione colorante stock.

• Mescolare insieme i 200mL di soluzione tampone H3PO4-citrico e la bottiglia di acqua ossigenata.

• Inserire 50 mL di soluzione tampone in un cilindro graduato di 50 a 100 mL.

• Aggiungere 2,5 mL della soluzione madre colorazione utilizzando la micropipetta e mescolare.

• Questo posto di macchiatura di soluzione in un vassoio di plastica.

• Lavare la membrana con soluzione fisiologica (soluzione salina tamponata con fosfato o soluzione fisiologica tamponata) e immergerlo nella soluzione colorante. Lasciarlo in ammollo per tra 10 minuti e 1 ora.

• Quando la band diventa visibile, rimuovere la membrana e sciacquarlo sotto acqua corrente per 10 minuti interrompere la reazione.

Consigli & Avvertenze

  • Mescolare il diritto di soluzioni prima di utilizzarli. Consentire la reazione a prendere posto per 10 minuti prima di utilizzare la soluzione. In attesa di 30 minuti può produrre risultati falsi.
  • La membrana deve immergere a temperatura ambiente.
  • Lavare tutti i cilindri e i vassoi in acqua e poi in una soluzione di acido solforico (circa 1 mol di acido solforico per litro di acqua) per 30 minuti o più; Risciacquare con acqua deionizzata. Lasciarli asciugare completamente.
  • Conservare la membrana in un luogo buio.
  • Non lasciare che la soluzione di riserva che sforza toccare la tua pelle. Se lo fa, lavare immediatamente con acqua.