La cromatografia è un metodo di separazione di sostanza. Viene implementata utilizzando un tubo stretto (colonna) imballato con un materiale specifico. Una miscela di composti è forzata attraverso la colonna utilizzando la pressione. Ogni composto esce dalla colonna durante certi momenti, rappresentando graficamente un picco su un cromatogramma. La posizione del picco massimo, chiamato un tempo di ritenzione, è specifica per ogni composto. Prestazioni delle colonne cromatografiche sono espresso come numero di piatti teorici. Una piastra teorica è un livello immaginario all'interno di una colonna che aiuta a interpretare il processo di separazione. Un maggior numero di piatti teorici corrisponde alla migliore efficacia di colonna.
Istruzioni
• Ottenere un grafico di cromatogramma dalla tua colonna cromatografica.
• Tracciare una linea verticale da massimo del picco alla linea di base.
• Misurare la lunghezza di questa linea e dividerlo per 2 per trovare il centro della linea. In questi passaggi, fare tutte le misurazioni in millimetri (mm).
• Disegnare una linea che passa attraverso della linea centro e parallelo alla linea di base.
• Misurare la lunghezza della linea dal punto 4 per ottenere la larghezza del picco a metà-altezza. Ad esempio, la larghezza del picco è di 12 mm.
• Misurare la distanza da 0 al massimo per ottenere il tempo di ritenzione del picco. Ad esempio, il tempo di ritenzione è di 650 mm. nota che il tempo di ritenzione è normalmente espressa in minuti, ma è anche proporzionale alla lunghezza misurata.
• Dividere il tempo di ritenzione per la larghezza del picco e sollevare il quoziente in potenza di 2. Quindi moltiplicare il risultato per 5,55 per calcolare il numero di piatti teorici:
Numero di piatti teorici = 5,55 * (ritenzione larghezza tempo / picco) ^ 2
Nel nostro esempio, sarebbe 5,55 * (650 mm/12 mm) ^ 2 = 16.284 piastre teoriche. Il risultato viene arrotondato al numero intero.