Come calcolare il tempo morto sulla colonna LC

Cromatografia è ampiamente usato nel laboratorio chimico per determinare l'identità di un composto sconosciuto. Il composto sconosciuto scorre attraverso il materiale di imballaggio della colonna e interagisce con le particelle. Le interazioni tra le particelle e i composti nel campione sono basate su loro attrazione o solubilità ad uno altro. Molecole che hanno alcuna interazione per le particelle di materiale da imballaggio sono autorizzati a passare attraverso il materiale di imballaggio senza ostacoli. Il tempo richiesto per le molecole passino dall'iniezione punto nel sistema per il picco massimo di una molecola non reattivo è il tempo morto della colonna.

Istruzioni

• Picco del campione sconosciuto con una piccola quantità di un composto che non viene mantenuta dal materiale colonna. Il composto passa attraverso la colonna senza interagire con il materiale di imballaggio nella colonna.

• Caricare la siringa con circa 20 microlitri di campione e inserire l'ago della siringa nella porta di iniezione. Caricare il ciclo del campione della valvola di svuotamento della siringa nella valvola.

• Accendere lo strumento di cromatografia e avviare la fase mobile. La fase mobile fluisce attraverso lo strumento e trasporta il campione attraverso la colonna e rivelatore che termina nel contenitore dei rifiuti.

• Attivare la valvola che permette al campione di immettere il percorso che scorre del solvente. Il solvente trasporta i composti nel campione sulla parte superiore della colonna e separazione comincia.

• Monitorare l'uscita del segnale del rivelatore e identificare il primo picco nel cromatografo. La differenza tra il tempo di iniezione e il massimo del primo picco, rappresentato dal composto a spillo, è il tempo morto.

• Misurare la distanza tra il punto di iniezione e l'altezza massima del primo picco. Moltiplicare la distanza per la velocità della carta o asse di trovare il tempo morto.