Come calcolare CFU da diluizione

CFU è sinonimo di unità formanti colonia, un termine in microbiologia utilizzato per quantificare quanti batteri sono presenti in una soluzione. A seconda della concentrazione del campione, sarà necessario eseguire diluizioni multiple e piastra i diversi campioni su piastre di Petri. Se ci sono troppe colonie batteriche, essi saranno difficili da contare, e se ci sono troppo pochi, il campione non può essere rappresentativo. È generalmente una buona idea di piatto la soluzione originale, poi una diluizione di 1: 10 (1 parte di soluzione, soluzione fisiologica 9 parti), una diluizione di 1/100 e possibilmente una diluizione di 1/1000.

Istruzioni

Calcolo CFU da diluizione batterica

• Eseguire un conteggio preliminare di ogni piatto una volta che i batteri hanno avuto tempo per incubare, solitamente uno o due giorni. Si desidera conteggio solo singole colonie, che devono essere distinte, isolato puntini, non un intero blob delle diverse colonie cresciute insieme. Scegliere il piatto che ha più di 30 di queste colonie, ma meno di 300.

• Contare il numero di diverse colonie. Questo è il numero CFU di tuo diluizione..--si dovrà eseguire un semplice calcolo per determinare il CFU del campione originale. In questo esempio, verrà utilizzata un'ipotetica piastra contenente 46 colonie.

• Determinare la dimensione della diluizione che è stato utilizzato. Idealmente, si etichettato le capsule di Petri prima del tempo. In questo esempio, è possibile mescolare 1 mL di coltura batterica con 99 mL di soluzione fisiologica. Si tratta di una diluizione 1/100.

• Moltiplicare il grado di diluizione per l'importo che effettivamente placcato. Se, in questo esempio, è placcato in 0,1 mL di tuo diluizione 1/100 sull'agar, si moltiplica 0,1 x 1/100, per un risultato di 1/1000 o 0,001.

• Dividere il CFU della diluizione (il numero di colonie che è contato) per il risultato dal passaggio 4. Per questo esempio, si sarebbe dividere 46 da 1/1000, che equivale a moltiplicare per 1.000. Il risultato è 46.000 CFU nel campione originale.