Che cosa è il protocollo di analisi di proliferazione delle cellule T?

Che cosa è il protocollo di analisi di proliferazione delle cellule T?

Le cellule T sono il tipo più abbondante di cellule bianche del sangue che si specializzano in associazione all'antigene o entità straniere. Saggi di proliferazione di laboratorio per le cellule T sono utilizzati per studiare la risposta immunitaria comunicata per cellule in animali.

Purificazione delle cellule T

Procedure di purificazione sono svolte prima dell'inizio dell'esperimento. Le cellule T prelevate dai nodi della milza o linfonodi degli animali sono purificate con lavaggio minimo essenziale Medium (DMEM) di un Dulbecco. Il lavaggio viene miscelato per contenere lo stesso tipo di siero normale come l'animale cellule essere dosati, penicillina-streptomicina e la chimica 2-mercaptoetanolo.

Incubazione

Le cellule T devono essere incubate in un incubatore alla temperatura di 37 gradi Celsius per almeno trenta minuti. Le cellule vengono poi messi in una centrifuga per un minimo di otto minuti a 800 giri al minuto.

Analisi di proliferazione

Le cellule T sono dissolti utilizzando DMEM riscaldato e una centrifuga a 10,0000 rotazioni al minuto. Sono poi trasferiti in un contenitore sterile o tubo e raffreddati in un congelatore a-20 gradi. Le cellule T sono proliferate inserendoli in una piastra ben 96 e incubazione in un'incubatrice di anidride carbonica per un paio di giorni. 0,5-1,0 milliCurie di idrogeno tre etichettato timidina viene aggiunta ai pozzetti ed incubato per un ulteriore 15-18 ore. Le cellule vengono poi messi su un filtro di vetro per scintillazione contando (rilevazione di radiazioni nelle cellule).


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