L'apparato di elettroforesi del gel include diversi componenti, ognuno dei quali sono la chiave per il processo che si verifica quando si esegue frammenti di DNA o proteine sul vostro gel. Capire come questi componenti funzionano e interagiscono vi darà una migliore comprensione di come funziona l'elettroforesi del gel..--e come si possono interpretare i risultati.
Colorazione e visualizzazione
Gel in genere sono macchiati con una sostanza chimica chiamata il bromuro di etidio, che può diventare inserito tra i due filamenti in un frammento di DNA double-stranded. Brilla fluorescente quando associato a DNA, esponendo così il gel ai raggi ultravioletti farà le bande dei frammenti del DNA chiaramente visibile. Luce UV è dannoso per gli occhi umani, naturalmente, così il gel è esaminato solitamente in una lightbox ultravioletta chiamata un transilluminatore. Il gel UV-illuminato anche in genere viene fotografato così i risultati possono essere analizzati successivamente.
Gel
Il gel utilizzato per elettroforesi di frammenti di DNA è stato effettuato in agarosio, un polimero di amido-come trovato in alga. Preparare il gel è una semplice questione di agarosio in polvere di miscelazione con un buffer di chimico e di riscaldamento in un forno a microonde; il gel può poi essere versato e lasciato raffreddare. Le proteine sono solitamente separate su un gel di poliacrilammide; Questo gel è preparato da un monomero chiamato acrilamide. Aggiunta di ammonio persolfato e tetramethylenediamine (o TEMED) per l'acrilamide miscela determina l'acrilamide di polimerizzare e indurire. L'acrilammide è una neurotossina, così questi gel..--come tutte le sostanze chimiche di laboratorio..--mai devono essere maneggiati senza guanti.
Serbatoio
Il serbatoio è fatto di plastica; Esso contiene un letto gel (o vassoio colata gel) su cui si troverà il gel. Su entrambi i lati sono due deflettori di plastica che tengono il gel in posizione mentre si sta raffreddando. Una volta che il gel si è solidificato, egli serbatoio viene riempito con buffer di modo che il livello del buffer si trova appena sopra il gel; il coperchio della camera di elettroforesi contiene gli elettrodi che forniscono corrente dalla fonte di alimentazione, che mantiene una tensione impostata. Una volta che il potere è acceso, i frammenti di DNA negativamente inizierà a migrare verso l'elettrodo positivo (anodo). Elettroforesi del gel con le proteine è simile, ma il gel viene eseguito verticalmente.
Pettine & micropipetta
Quando si versa il gel, un pettine di plastica è utilizzato per creare piccole depressioni quadrate..--chiamate pozzi - nel gel. I campioni di DNA verranno successivamente caricati in questi pozzetti con una micropipetta. Come più grande pipette, una micropipetta è progettata per prendere ed erogare un volume accuratamente tarato di liquido. Micropipette sono generalmente regolabili in modo che l'utente può determinare quanti microlitri vogliono aggiungere. La soluzione è contenuta nella punta della micropipetta in plastica, che viene generalmente utilizzata solo una volta prima di essere scartato per evitare contaminazioni.