La reazione a catena della polimerasi o PCR, è una tecnica di biologia molecolare utilizzata per amplificare regioni specifiche del DNA. PCR è dipendente da iniettori, che sono brevi filamenti di DNA che sono complementari e specifico per il DNA di interesse. Mentre primer generalmente si legano al DNA loro sequenza di corrispondenza, hanno occasionalmente verrà associare a e amplificare l'altra, causando il fenomeno noto come un dimero di primer.
Istruzioni
• Esaminare il contenuto di GC (numero di G e di C) nella vostra sequenza di primer. Incollaggio di GC è più forte ad incollaggio a causa il legame idrogeno aggiuntivo tra la guanina e citosina. Incollaggio ottima è almeno il 50 per cento contenuto di GC.
• Esaminare la temperatura di ricottura della vostra reazione. Basse temperature, generalmente definite come 55 C o di sotto, di ricottura possono causare legame non specifico del primer, che può causare dimeri oltre ad amplificazione di sezioni genomici non corretti.
• Controllare la quantità e la concentrazione degli iniettori che hai aggiunto per la PCR. Un eccesso di primer, generalmente più di 75 picomoli, può causare dimeri dell'iniettore, pure.