Densità ottica - una misura del limite a cui una sostanza trasmette la luce-- viene spesso utilizzata per misurare la concentrazione di cellule o particelle che sono dispersi, ma non sciolto, in un fluido. La densità ottica corretta di questo tipo di miscela, noto come una sospensione, è direttamente proporzionale alla concentrazione, densità o numero di cellule dislocati in esso.
Legge di Lambert-Beer
La legge di Beer-Lambert, che afferma che assorbanza è proporzionale o ha un rapporto lineare con la concentrazione della specie assorbente, vale solo per le densità ottiche sotto 0,4. Tuttavia, i campioni con densità ottiche superiori a 0,4 può essere diluito di un fattore di diluizione definiti e la loro densità ottica misurata. Se i valori misurati sono divisi per il fattore di diluizione, per produrre la densità ottica corretta, questo nuovo valore è proporzionale al numero di cellule nel campione.
Spettrofotometro
Densità ottica è misurata da uno strumento, noto come uno spettrofotometro, che mette a confronto la luminosità della luce emessa da due fonti, uno dei quali ha determinate caratteristiche standard. Quando la luce passa attraverso una sospensione cellulare, la luce viene dispersa dalle cellule in modo che meno di esso raggiunge una cellula fotoelettrica--un dispositivo elettronico in cui uscita elettrica varia secondo la forza della luce che cade su di esso..--all'interno dello spettrofotometro. Così, più alto il numero delle cellule in sospensione il più debole l'uscita elettrica della cellula fotoelettrica e viceversa.
Correzione della densità ottica
Alle densità ottiche sopra 0.4, i gradi a cui le cellule possono essere nascosta da altre cellule o riflettono la luce molte volte è apprezzabile. A densità ottiche superiori, la densità ottica non riveduta delle sospensioni di cellule non è direttamente proporzionale al numero di cellulare. Tuttavia, la densità ottica non riveduta delle sospensioni di cellule diluito è quasi proporzionale alla loro densità relativa accuratamente nota..--il rapporto delle loro densità a quella di una sostanza di riferimento, come l'acqua..--quindi è una ragionevole ipotesi di lavoro che la densità ottica non corretta di una sospensione di cellule altamente diluite, di fatto, la sua densità ottica vero.
Densità ottica relativa
Moltiplicando il valore di densità relativa di qualsiasi sospensione cellulare per il valore di densità ottica base ottenuto dalla sospensione delle cellule altamente diluito, è possibile ottenere la corretta densità ottica. Tuttavia, per rendere la misurazione più accurata possibile, il valore di densità ottica base dovrebbe essere ottenuto da molteplici letture spettrofotometro.