Le nozioni di base
Estrazione del DNA (acido desossiribonucleico) è un processo con molte applicazioni scientifiche vitale. Nella ricerca e nella medicina, suoi usi includono DNA sequencing, rilevamento di virus e batteri e l'indagine di disturbi e malattie su base genetica. Nel campo delle scienze forensi, esso viene utilizzato per l'identificazione dei morti e dei vivi, così come per l'analisi di scena di crimine. Nonostante i risultati sofisticati, è in realtà abbastanza semplice estrazione del DNA stesso, e tecniche di estrazione base funzionano altrettanto bene in un laboratorio di ricerca o a casa.
Estrazione del DNA inizia con l'acquisizione di un campione di DNA. Poiché tutti gli organismi viventi contengono DNA, le opzioni di esempio disponibili sono praticamente infinite, e scelta di solito riguarda direttamente il soggetto in esame. Il DNA umano è facilmente ottenuto tamponando l'interno della guancia di una persona con un batuffolo di cotone. Campioni di piante possono essere acquisiti dal taglio di una sezione del materiale sorgente.
Estrazione in laboratorio
Una volta ottenuto un campione, devono essere ripartito per ottenere il materiale genetico all'interno delle singole cellule. In laboratorio, un campione viene posto in genere in un dispositivo chiamato un tubo Eppendorf. Una soluzione speciale viene quindi aggiunto al tubo e il tubo è posto in un bagno di acqua calda. Lo scopo della soluzione è quello di fare l'elettrolisi (abbattere) struttura cellulare del materiale. Esso contiene due ingredienti chiave: un detergente appositamente progettato e un enzima chiamato proteinasi K. Una volta nel bagno d'acqua calda, detersivo corrode membrana cellulare del campione così come la membrana nucleare che circonda il materiale genetico della cellula. Una volta che queste membrane sono interrotti, la proteinasi K rompe una proteina chiamata istone, cui è avvolto il DNA.
Il tubo Eppendorf viene quindi rimosso dal bagno di acqua e una soluzione salina concentrata viene aggiunto ad ammassarsi le proteine indesiderate e detriti cellulari. Il tubo viene posto in una piccola centrifuga, dove la forza centrifuga lascia il DNA diffuso in uno strato di soluzione sopra il materiale in eccesso più pesante. Il DNA viene quindi rimosso e inserito di per sé in un'altra provetta. Alcool isopropilico viene aggiunto al DNA e accuratamente miscelato. Questo processo impone il DNA dalla soluzione, che ragruppa in fili visibili. Il materiale viene poi messo attraverso la centrifuga ancora una volta a forzare i filamenti di DNA insieme. L'alcol viene rimosso, e il DNA si lascia asciugare. Una volta completato questo processo, il campione di DNA risultante possa essere memorizzato e utilizzato per uno qualsiasi dei suoi molti scopi.
Estrazione a casa
Lo stesso processo di estrazione base può essere eseguito a casa, utilizzando frutta, verdura o carne. Il materiale scelto è collocato in un frullatore della famiglia insieme con acqua fredda e sale da tavola. Una volta che questi elementi si fondono insieme, l'impasto risultante è tesa in un altro contenitore. Detergente liquido viene quindi aggiunto, e questa miscela è collocata in una provetta e lasciata riposare per un po'. Inteneritore o ananas succo di carne viene quindi aggiunto per fornire gli enzimi necessari. Il passo finale è l'aggiunta di alcool, che costringe il DNA di ciuffo in fili che possono essere tirati dalla provetta.