Trigliceridi nel plasma sono indicatori di molte differenti condizioni di salute. I trigliceridi sono molecole di grasso che sono più solubili in solventi organici rispetto all'acqua. Metodi di estrazione sono basati sulle proteine del siero di partizionamento e indirizzo acqua/solvente che accompagnano i trigliceridi nel plasma.
Estrazione totale del lipido
I trigliceridi possono essere estratti come parte dei lipidi di totale del plasma. Cloroformio è forse il più efficace solvente organico per le estrazioni del lipido totale. Per esempio, prendere 200 microlitri di plasma. Aggiungere 300 microlitri di potassio fosfato monobasico, 1,5 ml cloroformio e 0,5 ml di metanolo. Vortex o agitare il campione vigorosamente per 2-5 minuti. Raccogliere la fase inferiore (biologica) con una pipetta e asciugare sotto azoto per ottenere la frazione totale di lipidi contenenti i trigliceridi. Il principio generale di estrazione biologica consiste nell'utilizzare una fase organica che è insolubile con acqua così i lipidi sono separati nella fase organica e separati dal resto del campione.
Separando i trigliceridi da altri lipidi
Apparecchio da laboratorio specializzato è richiesto per la separazione dei trigliceridi da lipidi di massa. Metodi di estrazione comuni includono HPLC (cromatografia liquida ad alte prestazioni), GC (GASCROMATOGRAFIA), MS (spettrometro di massa) e combinazioni di queste tecniche. Diversi protocolli analitici vengono utilizzati per determinare diversi tipi di informazioni sui lipidi quali i trigliceridi nel sangue.
Altre considerazioni
Per evitare l'uso di cloroformio (che è tossico), esano e isopropanolo può essere utilizzati come solvente organico. Mix 3/2. Lo strato organico sarà lo strato superiore, non lo strato inferiore come quando viene utilizzato il cloroformio. Estratti lipidi non devono essere conservati allo stato secco. È meglio conservare Estratti lipidi in miscele di cloroformio/metanolo a-70 gradi C. lipidi deve essere conservati in contenitori di vetro con le fodere di Teflon sui tappi. Antiossidanti come il BHT possono essere aggiunto per prolungare la conservazione sicura.