Come identificare i picchi di Unknown in cromatografia

Come identificare i picchi di Unknown in cromatografia

Laboratori utilizzano comunemente il processo di cromatografia per analizzare campioni per determinare la loro composizione chimica. In cromatografia in fase gassosa, un campione diluito è vaporizzato e scaricato attraverso una colonna imballata con il materiale che separa i componenti. Nella cromatografia liquida, una soluzione del campione in solvente è pompata attraverso una colonna e separata. In entrambi i casi, un rilevatore all'estremità della colonna risponde agli agenti chimici come escono. Quanto tempo che ci vuole un dato prodotto chimico per viaggiare attraverso la colonna è generalmente costante ed è possibile utilizzare quel tempo per identificare le incognite.

Istruzioni

• Esaminare l'output del rivelatore---il "cromatogramma"---prodotto dalla strumentazione cromatografo in risposta al test campione sconosciuto. Il cromatogramma è un complotto dell'uscita rivelatore con intensità di uscita sull'asse verticale e tempo trascorso poiché il campione è stato introdotto nello strumento sull'asse orizzontale. Il cromatogramma Mostra picchi (forti aumenti nell'output del rivelatore) ai tempi dove vari prodotti chimici uscito la colonna.

• Nota il tempo di uscita---spesso anche denominato il "tempo di ritenzione"---di ogni picco nel cromatogramma. Ci sarà un picco e quindi un tempo di ritenzione per ogni prodotto chimico sconosciuto nella miscela che è stata testata. Ad esempio, si potrebbero vedere picchi a 7,8 e 10,2 minuti.

• Ottenere campioni standard puri delle sostanze chimiche ritenute eventualmente presente nel campione che è stato testato. Questo richiede alcune congetture, ma un laboratorio avrà spesso una buona idea, in base al tipo e origine del campione. Per esempio, un campione di terreno da una stazione di benzina abbandonata probabilmente avrà tracce di componenti di gas come benzene e toluene.

• Preparare soluzioni diluite di standard chimici in un solvente adatto; una soluzione per ogni prodotto chimico. Generalmente si utilizza lo stesso solvente in cui sciolto il vostro campione quando prepararla per l'analisi. Per liquidi, è necessario utilizzare una pipetta per trasferire una quantità conosciuta in un matraccio. Per i solidi, pesare una quantità nota e trasferimento. In ogni caso, è quindi riempire il pallone con solvente e mix. Si dovrà stimare la concentrazione da utilizzare per ciascuna soluzione. In generale, per cromatografia in fase gassosa è possibile produrre campioni nelle basse parti per milione (ppm) e per cromatografia liquida nella gamma alta ppm.

• Iniettare ciascuna delle soluzioni chimiche standard sulla strumentazione cromatografica ed esaminare i cromatogrammi risultanti.

• Confrontare i tempi di ritenzione ottenuti per ogni standard chimici per i tempi di ritenzione dei picchi nel cromatogramma campione sconosciuti. Se il tempo di mantenimento di uno standard corrisponde a quello di un picco nel campione, è possibile identificare quel picco sconosciuto come essendo dovuto quel campione. Nel caso dell'esempio con picchi a 7,8 e 10,2 minuti, se il tuo picco standard di benzene era a 7,8 minuti, si concluderebbe che il primo picco sconosciuto nel campione è stato a causa di benzene.

Consigli & Avvertenze

  • Poiché è possibile per i diversi prodotti chimici avere gli stessi tempi di ritenzione in alcune condizioni, questo metodo non produrrà la prova assoluta che il campione contiene i prodotti chimici che è stato identificato. Potrebbe essere necessario utilizzare un'altra tecnica analitica per la conferma.