Uno spettrofotometro è uno strumento complesso utilizzato da laboratorio e gli scienziati forensi per identificare la composizione chimica di sostanze sconosciute. Spettrofotometri funzionano misurando l'assorbanza di molecole in una sostanza. Tuttavia, gli spettrofotometri utilizzabile anche per misurare i parametri di qualità dell'acqua come pH.
Istruzioni
Preparare l'ignoto e soluzioni note per la misurazione
• Indossare occhiali protettivi e guanti. Pipettare 10 mL di verde di bromocresolo indicatore in un matraccio tarato da 50 mL. Utilizzare un cilindro graduato per aggiungere 25 mL della soluzione con il pH sconosciuto e diluirla fino alla tacca di 50 mL con acqua deionizzata.
• Pipettare 10 mL di verde di bromocresolo indicatore in un matraccio tarato secondo 50 mL. Utilizzare un cilindro graduato per aggiungere 25 mL di soluzione di HCl 0,1 M e diluirla fino alla tacca di 50 mL con acqua deionizzata.
• Pipettare 10 mL di verde di bromocresolo indicatore in un matraccio tarato da terzo a 50 mL. Utilizzare un cilindro graduato per aggiungere 25 mL della soluzione di NaOH 0.1 M e diluirla fino alla tacca di 50 mL con acqua deionizzata. Ora avete tre matracci separato 50 mL contenente tre soluzioni su misura.
Stabilire la linea di base acqua deionizzata
• Sciacquare la provetta con l'acqua del rubinetto e risciacquare con acqua deionizzata.
• Riempire la cuvetta con acqua deionizzata e metterlo da parte in un titolare.
• Utilizzare lo spettrofotometro per misurare gli spettri dell'acqua deionizzata. Si instaura così un spettri della linea di base per il confronto.
Misurare gli spettri delle soluzioni noti e sconosciuto
• Utilizzando la soluzione campione sconosciuto nel primo pallone volumetrico da 50 mL, risciacquare la cuvetta due volte, poi riempire con soluzione. Disponga la provetta nella titolare e misurare e registrare lo spettro del campione sconosciuto.
• Utilizzando la soluzione di HCl nel secondo pallone volumetrico da 50 mL, sciacquare la cuvetta due volte e poi riempire con soluzione. Disponga la provetta nella titolare e misurare e registrare lo spettro della soluzione di HCl.
• Utilizzando la soluzione di NaOH nel terzo pallone volumetrico da 50 mL, sciacquare la cuvetta due volte e poi riempire con soluzione. Disponga la provetta nella titolare e misurare e registrare lo spettro della soluzione di NaOH.
Calcolo del pH del campione sconosciuto
• In Excel o a mano, inserire l'assorbanza e pHs dei due campioni conosciuti in una tabella come segue:
pH di NaOH pH di HCl
assorbanza di assorbanza di NaOH di HCl
• Aggiungere una riga alla tabella per calcolare il log dei valori di assorbanza per le soluzioni di NaOH e HCl:
pH di NaOH pH di HCl
assorbanza di assorbanza di NaOH di HCl
Registro (assorbanza di NaOH) registro (assorbanza di HCl)
• Grafico i valori di pH vs log (assorbanza) per i campioni noti di soluzione di NaOH e HCl soluzione. Inserire i dati di pH su asse x e i dati di registro (assorbanza) sull'asse y. Tracciare una linea attraverso i due punti per stabilire la relazione lineare.
• Poiché è stata misurata l'assorbanza del campione sconosciuto, calcolare il log dell'assorbanza del campione sconosciuto.
• Stampa il valore del registro dell'assorbanza del campione sconosciuto come un punto sull'asse Y del grafico e disegnare una linea orizzontale fino a quando intercetta il grafico lineare. Tracciare una linea verticale verso il basso per l'asse x, quindi leggere il valore di pH del campione sconosciuto.
Consigli & Avvertenze
- Utilizzare un pHmetro digitale per confermare i risultati.
- Sciacquare la cuvetta bene tra leggendo l'assorbanza dei campioni differenti.
- Indossare sempre protezioni protettive come occhio occhiali e guanti quando si lavora in un laboratorio.
- Evitare di toccare la punta della provetta al dito, perché gli oli sulla pelle potrebbero introdurre errori nella misurazione.