Come assemblare elettroforesi verticale

Elettroforesi del gel è usata per separare le proteine o acidi nucleici. Sistemi di elettroforesi verticale vengono utilizzati per separare proteine mediante Western blotting o per separare le piccole quantità di DNA, ad esempio, reazione a catena della polimerasi seguente. La proteina o acido nucleico muoversi attraverso il gel in risposta ad una corrente elettrica e sono separati dalla dimensione. La percentuale di gel utilizzato determinerà la risoluzione a causa della dimensione dei pori e il più piccolo della proteina in dimensione maggiore è la percentuale di acrilammide.

Istruzioni

• Selezionare le lastre di vetro e distanziali e posizionare i distanziali tra le due lastre, con le lastre di vetro più corta nella parte anteriore. Morsetto in stand per consentire di versamento del gel mix.

• Compongono la miscela di gel per la percentuale richiesta, che dipende dalle dimensioni della proteina in fase di studio. Versare la miscela tra due lastre di vetro, evitando bolle; Inserire delicatamente il pettine, che creerà pozzi per i campioni. Consentono di impostare.

• Costituiscono un buffer di esecuzione appropriato. Rimuovere le lastre di vetro dal supporto e morsetto in apparecchi di elettroforesi, in cassette. Mettere nel serbatoio di elettroforesi e aggiungere buffer al serbatoio esterno e quello interno.

• Preparare i campioni con il tampone di caricamento e, se necessario, denaturare riscaldando un campione e l'aggiunta di denaturanti. Togliere il pettine e con cura il campione con il tampone di caricamento viene posto a wells. Lasciare bene per marcatori molecolari e controllo positivo. Collegare il coperchio e il power pack ed eseguire secondo le istruzioni di power pack.