La macchia acid-fast è un test differenziale per identificare la presenza di alcuni tipi di batteri in un dato campione. Ci sono tre tipi comuni di macchiatura acid-fast, che sono spesso utilizzati nei laboratori per determinare l'agente eziologico di una certa infezione.
Definizione
La macchia acid-fast è un test di laboratorio per distinguere i componenti di una sostanza e per determinare se contiene batteri acido-resistenti quali del micobatterio.La macchia acid-fast ha tre componenti di base che comprendono la colorazione primaria, macchia decolorante e contatore.
Batteri acid-fast
I batteri acid-fast (AFB) sono organismi coperti con un duro strato ceroso esterno chiamato capsula del lipoide. Mycobacterium tuberculosis (agente eziologico della tubercolosi), Mycobacterium leprae (agente eziologico della lebbra) e Nocardia asteroids (agente eziologico della nocardiosi) sono i più comuni batteri acid-fast.
Procedura di macchiatura acid-fast
La procedura di colorazione acid-fast è fatto solitamente in tre fasi: prolungata applicazione di colorazione primaria per una sbavatura; lavare lo striscio colorato con metanolo e acido cloridrico (decolorante); e applicazione di contatore macchia dello striscio lavato, che identifica i batteri acid-fast dal resto degli organismi trovati nello striscio.
Tipi di procedura di macchiatura acid-fast
I tre tipi di macchiatura acid-fast sono Ziehl-Neelson, Kinyoun e fluorocromo. La colorazione primaria per Ziehl-Neelson e Kinyoun è carbolfuschin colorante mentre auramina è la colorazione primaria per fluorocromo.Nel metodo Ziehl-Neelson, la colorazione primaria è prolungata da calore e utilizza il blu di metilene come macchia di contatore.Nel metodo di Kinyoun, la colorazione primaria è prolungata da solvente lipidico e utilizza verde brillante come macchia di contatore.In fluorocromo, la macchia di contatore è il permanganato di potassio o arancio di acridina (illustrato nella figura 1 è una macchia acid-fast fluorocromo della tubercolosi del micobatterio, adattata da vaccini e malattie prevenibili: foto di tubercolosi, CDC)
Risultati positivi
Un positivo AFB in macchia di Ziehl-Neelson o Kinyoun appare asta-come rosso/fucsia su sfondo blu/verde mentre reagiscono in giallo-arancio barre appaiono in una macchia di fluorocromo.Un risultato positivo di macchiatura acid-fast indica un indizio per l'agente causativo presente in un'infezione. Secondo il "molecolare diagnosi Journal" dell'Università di Washington, "un risultato positivo non indica necessariamente la presenza del complesso M. tuberculosis (MTBC)." (Mostrato in figura 2 è positivo macchia acid-fast di tubercolosi del micobatterio, adattata dal giornale di diagnosi molecolare).